線粒體膜電位檢測
服務(wù)介紹：
線粒體膜電位檢測試劑盒（JC-1）是一種以JC-1 為熒光探針，快速靈敏地檢測細(xì)胞、組織或純化的線粒體膜電位變化的試劑盒，可以用于早期的細(xì)胞凋亡檢測。
服務(wù)目的：
通過檢測線粒體膜電位變化鑒定樣品的凋亡情況
服務(wù)原理：
JC-1為陽離子脂質(zhì)熒光染料，有單體和多聚體兩種存在狀態(tài)，兩者的發(fā)射光譜不同。正常健康線粒體的膜電位（△y）具有極性，JC-1依賴于△y的極性被迅速攝入線粒體內(nèi)，并因濃度增高而在線粒體內(nèi)形成多聚體，多聚體發(fā)射光為紅色熒光；而細(xì)胞發(fā)生凋亡時，線粒體跨膜電位被去極化，JC-1從線粒體內(nèi)釋放，紅光強(qiáng)度減弱，以單體的形式存在于胞質(zhì)內(nèi)，發(fā)綠色熒光。
服務(wù)流程：
1、細(xì)胞重懸于0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中，細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。；
2、用適當(dāng)?shù)姆椒ㄕT導(dǎo)細(xì)胞凋亡，同時設(shè)立陰性依照組合陽性對照組，收集細(xì)胞；
3、用PBS洗滌細(xì)胞三次，收集不多于1×106的細(xì)胞；
4、加入0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中37℃孵育20 分鐘。
5、在孵育期間，按照每1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
6、37℃孵育結(jié)束后，600g 4℃離心3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞。棄上清，注意盡量不要吸除細(xì)胞。
7、用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌2 次：加入1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì) 胞，600g 4℃離心3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。再加入1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g4℃離心3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。
8、再用適量JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用流式細(xì)胞儀分析。
服務(wù)說明：
1、檢測細(xì)胞株（若實驗室有，可共享）。
2、待測毒性藥物（根據(jù)實驗方案有無）。
3、實驗設(shè)計方案或參考文獻(xiàn)。
4、若另有疑問歡迎向本公司咨詢，我們將竭誠為您服務(wù)。
收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)/服務(wù)周期/提供結(jié)果：
詳談，我們會根據(jù)您的方案及需求制定詳細(xì)的服務(wù)協(xié)議。
【本公司合作項目】
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線粒體膜電位檢測（JC-1）/膜電位檢測
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